破除“血脉诅咒”，看F8 KO小鼠模型如何助力攻克血友病

血友病是临床上常见的伴X遗传隐性出血性疾病，由F8基因和F9基因突变导致体内的凝血因子Ⅷ（Coagulation factor Ⅷ, FⅧ）和凝血因子Ⅸ（Coagulation factor Ⅸ, FⅨ）含量降低或功能异常。80%-85%血友病是由F8异常导致的血友病A，根据血浆中FⅧ活性水平可将血友病A分为重型（<1%）、中间型（1%~5%）和轻型（>5%）。血友病的主要临床症状为出血表现，患者终身伴有自发性或外伤后长时间出血不止的倾向，主要表现为黏膜、肌肉和关节出血，甚至颅内出血威胁生命。F8基因主要在肝脏中表达，由于肝脏等组织标本不易获得，目前的研究多使用外周血（即外周血异位转录本）进行F8基因转录水平的研究。

血友病是先天性出血疾病，凝血因子替代疗法已经成为预防和治疗出血并发症的金标准。然而，常规静脉注射给药的不便以及伴随关节疾病的发展，人们需要替代治疗方案，如延长半衰期的产品，非因子凝血产品，阻断天然抗凝血剂和基因治疗。而备受瞩目则是为血友病患者提供了治愈潜力的基因治疗疗法，通过在功能基因转移后建立Ⅷ或Ⅸ因子的持续内源性表达，以取代血友病患者自身的缺陷基因。血友病非常适合进行基因治疗，因为血液因子水平的小幅增加可与严重感染患者出血表型的显著改善相关。例如B型血友病，有研究表明在F9Y38ID小鼠（F9基因的第371位酪氨酸突变为天冬氨酸）模型中，体内编辑效率为0.56%，即挽救了小鼠的凝血障碍。虽然目前基因治疗仍然存在递送载体和生产工艺优化的困难，但该领域正在快速发展并将改变严重血友病患者的治疗模式，同时也促进其他单基因疾病的基因治疗的发展。

赛业生物可提供模拟人类A型血友病的动物模型（产品编号：C001211，现可提供多周龄多性别F8 KO小鼠现货），该品系通过基因编辑对C57BL/6J小鼠的F8基因进行敲除以达到蛋白缺失的效果。该疾病模型纯合子小鼠可育，纯合雌性和半合雄性凝血因子Ⅷ活性与野生型小鼠相比显著降低，并且凝血时间延长，表现为典型的A型血友病模型。

F8 KO小鼠的FⅧ活性为C57BL/6J野生型小鼠的4%，属于中度A型血友病模型。（数据以 mean±SD表示，***代表p<0.001）

18周龄F8 KO小鼠未检查到FⅧ表达，FⅧ活性为2%；基因递送后FⅧ表达量及FⅧ活性均显著升高。