学习免疫细胞构建与培养哪家强？独家笔记带你一路翱翔

Answer：原代T细胞一般在体外的培养时间不超过三周，用于功能实验的T细胞建议培养时间在14天以内。

Answer：目前活化T细胞的方式有多种，市面上也有很多活化T细胞的试剂，大体可以分为：CD3和CD28抗体包被孔板法，磁珠活化扩增法，还有人工抗原提呈细胞活化扩增法，然后联合以细胞因子对T细胞进行扩增。其中磁珠法中用到的磁珠又具有不同的规格：纳米级以及微米级。不同方法扩增起来的T细胞最大的差异应该是在CD4和CD8阳性T细胞的占比上。T细胞的扩增倍数，依据所用方法不同，一般在几十倍到几百倍之间，一般扩增倍数达到100倍便可以满足实验的需求。

Answer：目前CAR-T细胞阳性率并没有明确的要求，目前的临床实验结果表明，即使5%左右的CAR-T细胞阳性率也可以取得良好的治疗效果，这一点在我们的研究过程中也得到了证明。但一般情况下我们要求CAR-T细胞阳性率大于10%。

Answer：目前这两种方法都有，但直接从PBMC中进行扩增的话，扩增起来的NK细胞可能纯度上略微差点。