表型稳定的VEGFA小鼠怎么构建?抗VEGF药物在眼科临床的应用有哪些?

由于眼部VEGF与脉络膜新生血管（choroidal neovascularization, CNV）的形成密切相关，因此被认为是治疗脉络膜及视网膜新生血管具有极大潜力的靶点，目前广泛应用于湿性年龄相关性黄斑变性（wet age-related macular degeneration, wAMD）的研究及治疗中。

抗VEGFA药物可发挥抗新生血管、消除水肿等作用，极大改善了wAMD患者的预后，临床上多采用玻璃体内注射的方式进行wAMD治疗。可以说，以VEGF作为靶点的药物为眼部新生血管疾病的治疗开辟了新途径。

由于VEGF是CNV生成的关键介质，因此，阻断或中和VEGF表达的药物便成为了近10年wAMD临床治疗的主要选择，如阿柏西普（Aflibercept）、康柏西普（Conbercept）、贝伐珠单抗（Bevacizumab）和雷珠单抗（Ranibizumab）。

阿柏西普是一种可溶性VEGF诱饵型受体，较雷珠单抗等药物相比，与VEGFA的所有亚型均具有更高的亲和力。阿柏西普通过抑制VEGF的活性来防止新血管的生长，从而减少液体渗漏和视网膜组织的水肿，2011年获批美国FDA用于治疗渗出性年龄相关性黄斑变性。

作为新型抗VEGF药物，阿柏西普具有半衰期长、给药间隔短等优点，但现有研究要远少于贝伐单抗、雷珠单抗等药物，在临床应用方面有更大的探索空间。

利用自研的hVEGF小鼠，赛业生物进行了阿柏西普等阳性药测试，评价靶向VEGF的抑制效果。FFA（荧光素眼底血管造影）结果显示，相比PBS对照组，阿柏西普给药后血管渗漏面积显著减小。

hVEGF小鼠的构建方式

赛业生物眼科CRO平台拥有一批眼科精细化操作技术人才及齐全的仪器设备，能熟练进行活体眼部检测技术，针对VEGFA小鼠，可进行眼表观察、眼压测量、眼底照相、图像引导OCT、全视野视网膜电图ERG、眼底荧光造影FFA等项目；同时具备专业病理及分子检测技术，包括视网膜VEGFA表达水平、FITC-Dextran 灌流视网膜铺片、眼球组织切片VEGF表达水平等评价血管病变情况。部分表型数据如下：

1.HE染色显示视网膜区域有血管增生。

HE染色结果

2.hVEGF小鼠过表达人源VEGFA，但是不影响本底鼠源VEGFA的表达。

眼球视网膜VEGF基因表达水平检测

3.IB4染色结果显示视网膜血管异常增生，且结构紊乱，脉络膜区域也有异常增生。

isolectin GS-lB4免疫染色

四、其他眼科模型推荐

除了以上提及的VEGFA小鼠模型，针对视网膜色素变性、先天性黑蒙、全色盲等疾病，赛业生物也开发了一系列基因编辑和人源化小鼠模型，同时可为研究人员提供个性化定制服务。