Adipoq-iCre小鼠|Adipoq-iCre工具鼠

产品编号：C001529

品系全称：C57BL/6JCya-Adipoq^{em1(P2A-iCre)}/Cya

品系背景：C57BL/6JCya

传代建议：纯合与纯合互配/杂合与杂合互配

品系描述

ADIPOQ基因编码的脂联素是一种蛋白质激素，仅由脂肪细胞产生，并通过血液传输到肌肉和肝细胞。脂联素调节与脂肪储存和代谢相关的多种途径，包括调节血糖水平、脂肪酸分解、棕色脂肪细胞分化和糖异生的负调控等。通过增加胰岛素敏感性和脂肪酸分解，脂联素调节体内的糖和脂肪代谢，并具有直接的抗糖尿病、抗动脉粥样硬化和抗炎活性^[1-2]。ADIPOQ基因突变与脂联素缺乏症有关。虽然ADIPOQ基因仅在脂肪组织中表达，但脂联素不仅存在于脂肪组织中，也广泛分布于肌肉、肝脏、肠道、雄性生殖腺和大脑等组织器官中^[3-4]。

Adipoq-iCre小鼠是通过将密码子优化后的Cre重组酶（iCre）基因表达元件插入到小鼠内源性Adipoq基因中，驱动其特异性表达而构建的。iCre重组酶表达模式与内源基因相似，且内源性Adipoq基因表达不受影响。当该小鼠与含有loxP位点的小鼠进行杂交时，其子代小鼠的白色脂肪组织（WAT）和棕色脂肪组织（BAT）中可以发生由Cre重组酶介导的loxP位点间的序列重组。

构建方式

通过基因编辑技术将P2A-iCre基因表达元件插入小鼠内源性Adipoq基因终止密码子处，其特异性表达受小鼠Adipoq基因的调控。

验证数据

检测方法

将Adipoq-iCre小鼠与条件性表达tdTomato荧光蛋白的Rosa26-LSL-tdTomato小鼠交配，产生双基因杂合子代小鼠。Cre重组酶介导表达终止元件（LSL）的删除将导致tdTomato蛋白在Cre阳性细胞中的表达。当子代小鼠发育到6周龄时，采集小鼠白色脂肪组织、棕色脂肪组织、骨骼肌、皮肤、肺、心、睾丸和卵巢组织并通过免疫荧光（IF）分析tdTomato蛋白的分布，以确定Cre重组酶的表达情况。

基因型

Cre+：Adipoq-iCre[KI/+];Rosa26-LSL-tdTomato[CKI/+]；

Cre-：Rosa26-LSL-tdTomato[CKI/CKI]。

检测结果

Cre重组酶在白色脂肪组织和棕色脂肪组织中的表达情况

图1. 白色脂肪组织和棕色脂肪组织中tdTomato蛋白表达的免疫荧光（IF）检测。检测结果显示在Cre+小鼠的脂肪细胞中存在大量tdTomato红色荧光，显示在此类细胞中Cre重组酶介导的tdTomato表达。而Cre-小鼠的白色脂肪组织和棕色脂肪组织中几乎检测不到Cre重组酶的活性。

Cre重组酶在骨骼肌和皮肤中的表达情况

图2. 骨骼肌和皮肤中tdTomato蛋白表达的免疫荧光（IF）检测。检测结果显示在Cre+小鼠骨骼肌旁和皮肤的脂肪细胞中存在部分红色荧光信号，显示在此类细胞中已发生Cre重组。而Cre-小鼠的骨骼肌和皮肤中几乎不存在Cre重组酶的活性。

Cre重组酶在肺部和心脏中的表达情况

图3. 肺部和心脏中tdTomato蛋白的表达的免疫荧光（IF）检测。检测结果显示在Cre+小鼠肺、支气管脂肪细胞中存在部分荧光信号，同时在小鼠心脏中观察到极少量的荧光信号。而Cre-小鼠的肺部和心脏中几乎不存在Cre重组酶的活性。

Cre重组酶在睾丸和卵巢中的表达情况

图4. 睾丸和卵巢中tdTomato蛋白的表达的免疫荧光（IF）检测。检测结果显示在Cre+小鼠睾丸中未观察到红色荧光信号，表明在此类组织中未发生Cre重组。而在Cre+小鼠卵巢周围脂肪、卵巢间质和黄体中存在少量荧光信号，显示在此类细胞中Cre重组酶介导的tdTomato表达。Cre-小鼠的睾丸和卵巢中几乎不存在Cre重组酶的活性。

总结

在Adipoq-iCre小鼠中，Cre重组酶的表达主要集中于白色脂肪组织（WAT）和棕色脂肪组织（BAT）中，组织表达特异性良好。此外，在小鼠骨骼肌、皮肤、肺部和心脏中存在部分重组信号，从组织学判断该类细胞可能是脂肪细胞。综上，该模型可用于靶向脂肪组织的组织特异性研究。

注意事项

该品系Cre重组酶基因表达元件插入位点位于小鼠第16号染色体上，请避免使用与Cre工具鼠同条染色体上打靶的基因编辑小鼠进行配繁。

参考文献

[1]Maeda K, Okubo K, Shimomura I, Funahashi T, Matsuzawa Y, Matsubara K. cDNA cloning and expression of a novel adipose specific collagen-like factor, apM1 (AdiPose Most abundant Gene transcript 1). Biochem Biophys Res Commun. 1996 Apr 16;221(2):286-9.

[2]Martinez-Huenchullan SF, Tam CS, Ban LA, Ehrenfeld-Slater P, Mclennan SV, Twigg SM. Skeletal muscle adiponectin induction in obesity and exercise. Metabolism. 2020 Jan;102:154008.

[3]Oliveira CS, Giuffrida FM, Crispim F, Saddi-Rosa P, Reis AF. ADIPOQ and adiponectin: the common ground of hyperglycemia and coronary artery disease? Arq Bras Endocrinol Metabol. 2011 Oct;55(7):446-54.

[4]Spranger J, Verma S, Göhring I, Bobbert T, Seifert J, Sindler AL, Pfeiffer A, Hileman SM, Tschöp M, Banks WA. Adiponectin does not cross the blood-brain barrier but modifies cytokine expression of brain endothelial cells. Diabetes. 2006 Jan;55(1):141-7.