KS小鼠|肺癌小鼠模型_构建_应用-赛业（苏州）生物科技有限公司

产品编号：C001514

品系全称：C57BL/6JCya-Kras^{tm1(LSL-G12D)}Sftpc^{em2(IRES-MerCreMer)}/Cya

品系背景：C57BL/6JCya

传代建议：杂合LSL-K-ras G12D小鼠与杂合/纯合Sftpc-MerCreMer小鼠互配

品系描述

KRAS原癌基因编码的K-Ras蛋白是RAS/MAPK信号通路的关键组成部分，它在细胞生长、增殖、成熟和分化等过程中起着重要的调控作用。KRAS基因突变是癌症发生的常见原因，大约有30%的癌症患者存在KRAS突变。这些突变主要是单碱基错义突变，其中超过80%的突变发生在第12个氨基酸残基（G12），尤其是KRAS G12D突变，这种突变在肺癌和胰腺癌中非常常见。G12D突变会增强K-Ras蛋白的活性，导致细胞生长和分裂失去控制，从而促进肿瘤的形成。K-Ras蛋白在小鼠和人类之间具有高度的保守性，只有在第132和187个氨基酸残基位点存在差异^[1-2]。

SFTPC基因负责编码肺表面活性物质C蛋白（SP-C），这是构成肺表面活性物质的四种主要蛋白质之一。肺表面活性物质是由磷脂和蛋白质组成的混合物，它覆盖在肺组织表面，降低呼吸阻力。这种物质由肺泡细胞产生并分泌，其主要功能是通过降低肺部液体的表面张力来保持肺组织的稳定。此外，SP-C蛋白还参与了肺的发育和功能，包括肺泡的形成、气道的重塑以及免疫防御。SFTPC基因主要在肺部表达，尤其在肺下叶、右肺、肺上叶、左肺上叶和脏层胸膜中的表达最为显著，同时也在其他组织中有较低水平的表达。Ⅱ型肺泡细胞是肺表面活性物质的主要生产和分泌细胞，SFTPC基因在这些细胞中高表达，并被视为这类细胞的特异性标记。

KS (inducible)小鼠是通过将LSL-K-ras G12D小鼠（条件性过表达K-Ras G12D突变基因小鼠品系，产品编号：C001064）和Sftpc-MerCreMer小鼠（Ⅱ型肺泡细胞特异性Cre重组酶表达小鼠，产品编号：C001501）进行交配，并通过他莫昔芬诱导来构建的诱导型（inducible）肺癌模型。他莫昔芬可以在子代小鼠的Ⅱ型肺泡细胞中触发Cre重组酶介导的loxP位点之间的序列重组，导致Ⅱ型肺泡细胞中的Loxp-Stop-Loxp（LSL）基因沉默元件被特异性地删除，从而使K-Ras G12D突变基因能够在肺部组织中选择性地表达。

构建方式

通过将LSL-K-ras G12D小鼠（产品编号：C001064）与Sftpc-MerCreMer小鼠（产品编号：C001501）交配获得。

研究应用

KS（inducible）小鼠可用于非小细胞肺癌（Non small cell lung cancer, NSCLC）发生和转移机制、治疗药物筛选、研发和评价等研究。

验证数据

生存曲线与生长曲线

图1. KS小鼠的生存情况与体重变化（n=10）。通过连续4天腹腔注射75mg/kg他莫昔芬，诱导4周龄KS小鼠发生肺癌，监测小鼠存活率和体重变化情况（注：本说明书后续实验中的小鼠均按照该方案进行他莫昔芬诱导）。结果显示，经他莫昔芬诱导后KS小鼠的体重显著降低，诱导后9周小鼠开始出现死亡，诱导后13周KS小鼠的死亡率达100%。

肺部CT检测

图2. 他莫昔芬（Tamoxifen）诱导后6周的KS小鼠和野生型对照组小鼠肺部CT扫描。结果显示，在4周龄时对KS小鼠开展他莫昔芬诱导，诱导6周后KS小鼠肺部出现明显的肿瘤组织浸润（图中浅色阴影部分）。

组织外观

图3. 他莫昔芬（Tamoxifen）诱导后6周、9周和12周雌性KS小鼠和野生型对照组小鼠的肺部和脾脏外观。结果显示，在4周龄时对KS小鼠开展他莫昔芬诱导，诱导后6周KS小鼠的肺部已出现肿瘤组织的生长侵袭，肺部呈致密膨大结构；诱导后12周KS小鼠的脾脏出现异常增生。

H&E染色

（1）肺部H&E染色

图4. 经他莫昔芬（Tamoxifen）和玉米油（Corn oil）处理后6周和12周雌性KS小鼠肺部组织H&E染色结果。在4周龄时对KS小鼠开展他莫昔芬诱导，与对照组相比，他莫昔芬诱导组的KS小鼠肺部出现明显浸润，经他莫昔芬诱导6周后KS小鼠的肺部已经开始出现明显癌变，诱导12周后时病变进一步加剧。

其他组织H&E染色

图5. 经他莫昔芬（Tamoxifen）和玉米油（Corn oil）处理后12周雌性KS小鼠肾脏、肝脏、脾脏和胰腺的H&E染色结果。在4周龄时对KS小鼠开展他莫昔芬诱导，与对照组相比，经他莫昔芬诱导12周后的KS小鼠肾脏、肝脏和胰腺组织正常，而小鼠脾脏中出现白髓异常增生。

参考文献

[1]Li S, Balmain A, Counter CM. A model for RAS mutation patterns in cancers: finding the sweet spot. Nat Rev Cancer. 2018 Dec;18(12):767-777.

[2]Filiberti A, Ventafridda V, Costa A. What is the best treatment for early breast cancer? A psychosocial answer. Ann Oncol. 1995 May;6(5):417-9.