H11-Alb-hTTR*V50M小鼠|小鼠Ttr基因人源化模型_价格

产品编号：C001525

品系全称：C57BL/6NCya-Igs2^{em1(Alb-hTTR*V50M)}/Cya

品系背景：C57BL/6NCya

传代建议：纯合与纯合互配

品系描述

转甲状腺素蛋白淀粉样变性（Transthyretin amyloidosis, ATTR）是一种蛋白质紊乱疾病，由错误折叠的转甲状腺素蛋白（Transthyretin, TTR）在全身器官和组织中的异常积累而引起，主要影响外周神经系统和心脏^[1]，遗传性ATTR（ATTRv）是由TTR基因的遗传突变导致的。TTR基因编码转甲状腺素蛋白（TTR），也称为前白蛋白（Prealbumin），该蛋白主要在肝脏合成，少部分形成于脑部的脉络丛或眼底的感光组织（如视网膜）。TTR是一种运输蛋白，正常生理条件下以同源四聚体的形式存在于外周血中，参与甲状腺素和视黄醇结合蛋白的运输。

目前已发现的TTR突变体超130种，其中Val50Met（V50M）突变（也被描述为c.148G>A或V30M）是遗传性转甲状腺素蛋白淀粉样变性多发性神经病（Transthyretin amyloidosis with polyneuropathy，ATTRv-PN）患者中最常见的突变^[8]。大多数携带Val50Met的ATTRv患者若未经治疗，在确诊后10至15年内会发展为全身残疾甚至死亡，其神经系统症状还可能伴有胃肠道功能损害、心肌病、肾病或眼部沉积。

ATTR的治疗方法主要是抑制突变型TTR基因mRNA的产生或稳定TTR蛋白四聚体的结构。现阶段，靶向TTR的治疗研究领域中已先后涌现出ASO药物、siRNA药物以及基于CRISPR的基因疗法等多种创新型治疗管线。小核酸药物头部企业Ionis研发的Inotersen Sodium通过靶向TTR mRNA 3’端非翻译区的保守序列，诱导mRNA降解以降低肝细胞TTR合成，是该疾病首个获批上市的ASO药物^[2]。由于大多数ASO、siRNA和基于CRISPR的疗法均作用于人源TTR基因，将小鼠基因进行人源化修饰将有助于加速靶向TTR的疗法迈入临床阶段。

本品系是小鼠Ttr基因人源化模型，利用基因编辑技术在H11安全位点处敲入由小鼠Alb启动子（肝脏特异性启动子）驱动的携带V50M突变的人源TTR基因片段，不影响鼠源Ttr基因的表达，可用于转甲状腺素蛋白淀粉样变性多发性神经病（ATTRv-PN）的研究。该模型纯合子是可存活且可育的。此外，基于自主研发的TurboKnockout融合BAC重组的技术创新，赛业生物还可针对不同点突变提供定制服务以满足广大研发人员的药效学等实验需求。

构建方式

图1. H11-Alb-hTTR*V50M小鼠基因编辑打靶示意图。将“Alb promoter-Human TTR Genomic DNA（1号外显子-4号外显子下游约0.5 kb）”插入至H11安全位点（Eif4enif1基因上游约0.7 kb，Drg1基因下游约4.5 kb）处，并在人源TTR基因2号外显子处引入p.V50M（GTG to ATG）点突变。

研究应用

H11-Alb-hTTR*V50M小鼠可用于转甲状腺素蛋白淀粉样变性（ATTR）致病机制和治疗药物的临床前评价等研究。

验证数据

人源TTR基因和鼠源Ttr基因表达的检测

图2. 3月龄雄性纯合H11-Alb-hTTR*V50M小鼠、B6-hTTR小鼠*和野生型小鼠（WT）肝脏和回肠中人源TTR基因和鼠源Ttr基因的表达检测。通过RT-qPCR检测小鼠中人源TTR基因和鼠源Ttr基因的表达，结果显示在H11-Alb-hTTR*V50M小鼠和B6-hTTR小鼠的肝脏和回肠中存在人源TTR基因的显著表达，并且携带了致病突变的H11-Alb-hTTR*V50M小鼠人源TTR mRNA的表达量显著高于野生型人源化B6-hTTR小鼠，而野生型小鼠（WT）体内不存在人源TTR基因的表达。由于H11-Alb-hTTR*V50M小鼠保留了鼠源Ttr基因并且不影响其表达，所以在野生型小鼠（WT）和H11-Alb-hTTR*V50M小鼠的肝脏和回肠均存在鼠源Ttr基因的表达，而不携带鼠源Ttr基因的B6-hTTR小鼠体内不存在鼠源Ttr基因的表达。（ND：Not detected，未检测到）

*B6-hTTR小鼠（产品编号：C001512）是小鼠Ttr基因人源化模型，将小鼠Ttr基因上游7.2kb到3'UTR区域替换为人源TTR基因上游7.2kb到3' UTR区域，详细信息请查看该模型的产品说明书。

ELISA检测人源TTR蛋白的表达

图3. 3月龄雄性纯合H11-Alb-hTTR*V50M小鼠、B6-hTTR小鼠和野生型小鼠（WT）的ELISA*检测结果。结果显示，H11-Alb-hTTR*V50M小鼠体内人源TTR蛋白的表达量显著高于野生型TTR基因人源化B6-hTTR小鼠，而野生型小鼠（WT）体内不存在人源TTR蛋白的表达。

罕见病数据中心（RDDC）

基因基本信息

临床突变信息

疾病介绍

转甲状腺素蛋白淀粉样变性（Transthyretin amyloidosis, ATTR）是一种蛋白质紊乱疾病，由错误折叠的转甲状腺素蛋白（transthyretin, TTR）在全身器官和组织中的异常积累而引起。ATTR可分为遗传性/突变型（ATTRv）和非遗传性/野生型（ATTRwt），而遗传性ATTR是由TTR基因的遗传突变导致。TTR基因的突变会导致异常淀粉样蛋白积累，损害身体器官和组织，包括外周神经系统和心脏，从而引发难以治疗的周围感觉运动神经病变、自主神经病变、心肌病等^[1]。

基因及突变介绍

TTR基因编码转甲状腺素蛋白（TTR），也称为前白蛋白，该蛋白主要在肝脏合成，少部分形成于脑部的脉络丛或眼底的感光组织（如视网膜）。TTR是一种运输蛋白，正常生理条件下以同源四聚体的形式存在于外周血中，参与甲状腺素和视黄醇结合蛋白的运输。TTR基因的突变会导致可遗传的家族性淀粉样变性病，如转甲状腺素蛋白淀粉样变性心肌病（Transthyretin Cardiac Amyloidosis Myocardiopathy, ATTR-CM）和转甲状腺素蛋白淀粉样变性多发性神经病（Transthyretin Amyloid Polyneuropathy, ATTR-PN），其致病机制是结构不稳定的异常TTR蛋白四聚体在外周神经系统、心脏、眼、肾脏、脑膜等组织中发展为病理聚集，形成不溶性淀粉样沉积，最终引发ATTR。ATTR为常染色体显性遗传病，目前已知超过130种基因突变可导致ATTR，其中以Val30Met突变最为常见，也就是V50M突变，其次为Val122lIle^[3]。Val50Met（V50M）突变，又被描述为c.148G>A或Val30Met（V30M）突变，是遗传性转甲状腺素蛋白淀粉样变性多发性神经病（Transthyretin amyloidosis with polyneuropathy, ATTRv-PN）患者中最常见的突变^[8]。大多数携带Val50Met的ATTRv患者若未经治疗，在确诊后10至15年内会发展为全身残疾甚至死亡，其神经系统症状还可能伴有胃肠道功能损害、心肌病、肾病或眼部沉积。

基因治疗

ATTR-CM和ATTR-PN的治疗方法主要是抑制突变型TTR基因mRNA的产生或稳定TTR蛋白四聚体的结构。现阶段，靶向TTR的基因治疗研究领域中已先后涌现出ASO药物、siRNA药物、基于CRISPR的基因疗法等多类型药物管线，其作用原理均为降低TTR蛋白的表达，减少致病蛋白的累积。Intellia公司的管线NTLA-2001通过将靶向TTR基因的CRISPR基因编辑系统递送到人体内，特异性敲除肝细胞内的TTR基因^[4]。基因治疗头部公司Ionis研发的Inotersen sodium是该疾病全球首个获批上市的ASO药物，该药物通过靶向TTＲmRNA 3端非翻译区的保守序列，诱导mRNA降解以降低肝细胞TTR的合成，其临床前研究所使用的疾病模型为转基因TTR（Ile84Ser）小鼠^[2]。此外，siRNA药物的临床前研究还使用到转基因TTR（V30M）小鼠^[5-6]。

综上所述，TTR基因是转甲状腺素蛋白淀粉样变性（ATTR）的重要致病基因。赛业生物的TTR全基因组人源化小鼠（B6-hTTR小鼠，产品编号：C001512）以及热门点突变疾病模型（H11-Alb-hTTR*V50M小鼠，产品编号：C001525）可应用于ATTR基因治疗的临床前研究，针对不同点突变赛业还可提供模型定制服务。

参考文献

[1]Saraiva M J M ,Birken S, Costa P P, et al. Amyloid fibril protein in familial amyloidotic polyneuropathy, Portuguese type. Definition of molecular abnormality in transthyretin (prealbumin)[J]. Journal of Clinical Investigation, 1984, 74(1):104-119.

[2]Keam, S.J. Inotersen: First Global Approval. Drugs 78, 1371–1376 (2018).

[3]Jacobson D R , Mcfarlin D E , Kane I ,et al.Transthyretin Pro55, a variant associated with early-onset, aggressive, diffuse amyloidosis with cardiac and neurologic involvement[J]. 1992, 89(3):353-356.

[4]Tongtong Cui, Bojin Li, Wei Li, NTLA-2001: opening a new era for gene therapy, Life Medicine, Volume 1, Issue 2, October 2022, Pages 49–51.

[5]Paula Gonçalves, Helena Martins, Susete Costelha, Luis F. Maia & Maria Joao Saraiva (2016) Efficiency of silencing RNA for removal of transthyretin V30M in a TTR leptomeningeal animal model, Amyloid, 23:4, 249-253.

[6]https://www.intelliatx.com/wp-content/uploads/Gillmore_NTLA-2001_ATTR_cardiomyop_AHA2022_05Nov22_vFINAL.pdf

[7]Habtemariam BA, Karsten V, Attarwala H, Goel V, Melch M, Clausen VA, Garg P, Vaishnaw AK, Sweetser MT, Robbie GJ, Vest J. Single-Dose Pharmacokinetics and Pharmacodynamics of Transthyretin Targeting N-acetylgalactosamine-Small Interfering Ribonucleic Acid Conjugate, Vutrisiran, in Healthy Subjects. Clin Pharmacol Ther. 2021 Feb;109(2):372-382.

[8]Connors LH, Lim A, Prokaeva T, Roskens VA, Costello CE. Tabulation of human transthyretin (TTR) variants, 2003. Amyloid. 2003 Sep;10(3):160-84.