RC-LR-DTR小鼠|RC-LR-DTR小鼠构建

产品编号：I001040

品系背景：C57BL/6J

传代方案：杂合与杂合（纯合）互配

主要表达部位：全身性

品系描述

DTR系统是一种新的基于小鼠细胞中白喉毒素受体(DTR)转基因表达和白喉毒素 (DT)的细胞谱系消融系统，通过在小鼠目标基因（大多是标记基因）位点敲入白喉毒素受体（Diphtheria toxin receptor, DTR）来实现表达特定基因细胞的选择性消融^[1]。当转入了DTR小鼠体内细胞上目标基因开始表达时，可以通过注射白喉毒素诱导该类细胞的死亡，从而达到细胞凋亡的目的。

DTR系统的核心是DT的毒性作用，DT是一种外毒素，在通过受体进入细胞内之后，由于其结构域中的C区含有ADP依赖的核糖体转移酶活性，能催化NAD+的ADP核糖基向延长因子（EF-2）转移，生成烟酰胺导致EF-2失活，从而阻断细胞蛋白质的合成，最后导致细胞死亡^[2]。但由于DTR在物种间的基因序列的差异，小鼠体内的白喉毒素受体不能与DT结合^[3]，但可以通过基因编辑技术将灵长类动物的DTR敲入在基因组中，使特定细胞表达DTR，DT进入小鼠体内后便能通过DTR进入到特定细胞，造成细胞特异性消融。

RC-LR-DTR小鼠是通过将DTR系统与条件性重组酶系统Cre-loxP和Dre-rox结合得到的，当该品系小鼠与Cre和Dre工具鼠交配后，可在特异性组织表达DTR以诱导组织和细胞的特异性消融。该品系杂合是可育的，纯合不会致死。

构建方式

通过基因编辑技术，将“CAG promoter-loxP-3*SV40 pA-loxP-Rox-3*SV40 pA-Rox-Kozak-DTR-rBG pA”组件敲入到ROSA26安全位点基因的1号内含子中。

注意事项

该品系定点插入的ROSA26位点位于小鼠6号染色体上，请避免使用插入位点与该品系小鼠在同条染色体上的Cre/Dre工具鼠进行配繁。

参考文献

Buch T, Heppner FL, Tertilt C, Heinen TJ, Kremer M, Wunderlich FT, Jung S, Waisman A. A Cre-inducible diphtheria toxin receptor mediates cell lineage ablation after toxin administration. Nat Methods. 2005 Jun;2(6):419-26.
Pappenheimer AM Jr, Harper AA, Moynihan M, Brockes JP. Diphtheria toxin and related proteins: effect of route of injection on toxicity and the determination of cytotoxicity for various cultured cells. J Infect Dis. 1982 Jan;145(1):94-102.
Raab G, Klagsbrun M. Heparin-binding EGF-like growth factor. Biochim Biophys Acta. 1997 Dec 9;1333(3):F179-99.