产品编号:C001528
品系全称:C57BL/6JCya-Col1a2em1(P2A-iCre)/Cya
品系背景:C57BL/6JCya
传代建议:纯合与纯合互配/杂合与杂合互配
品系描述
胶原蛋白α-2(I)链(COL1A2)基因编码I型胶原蛋白的pro-alpha2链,其三股螺旋结构由两个α1链和一个α2链组成。I型胶原蛋白是一种纤维形成胶原蛋白,广泛存在于大多数结缔组织中,尤其在骨骼、角膜、真皮和肌腱的细胞外基质中含量最高。它在细胞外基质中起着支撑和结构作用,并参与许多生物学过程,如细胞迁移、细胞黏附和细胞信号传导等。COL1A2基因的突变已被证实与多种疾病有关,包括I-IV型骨质疏松症、Ehlers-Danlos综合征VIIB型、隐性Ehlers-Danlos综合征古典型、特发性骨质疏松症以及非典型Marfan综合征。
Col1a2-iCre小鼠是通过基因编辑技术将密码子优化后的Cre重组酶(iCre)基因表达元件整合到小鼠内源性Col1a2基因的终止密码子处所构建的。该构建策略使Cre重组酶表达模式与内源性基因保持一致,同时保留小鼠Col1a2基因的正常表达。当Col1a2-iCre小鼠与含有loxP位点的小鼠杂交后,子代小鼠可在成纤维细胞中引发由Cre重组酶介导的loxP位点间的序列重组。
构建方式
通过基因编辑技术将P2A-iCre元件整合到小鼠Col1a2基因TAA终止密码子处,其特异性表达受小鼠Col1a2基因的调控。
验证数据
将Col1a2-iCre小鼠与条件性表达tdTomato荧光蛋白的Rosa26-LSL-tdTomato小鼠交配,以产生双基因杂合的子代小鼠。Cre重组酶介导表达终止元件(LSL)的删除将导致tdTomato蛋白在Cre阳性细胞中的表达。当子代小鼠发育到6周龄时,采集小鼠皮肤、心脏和肺组织并通过免疫荧光(IF)分析tdTomato蛋白的分布,以确定Cre重组酶的表达情况。
Cre+: Col1a2-iCre[KI/+];Rosa26-LSL-tdTomato[CKI/+];
Cre-: Rosa26-LSL-tdTomato[CKI/CKI]。
图1. 皮肤、心脏和肺部组织中tdTomato蛋白表达的免疫荧光(IF)检测。检测结果显示在Cre+小鼠皮肤的真皮层中存在tdTomato红色荧光,在心脏的心肌细胞之间、心脏瓣膜及心内膜中检测到红色荧光信号,同时在肺部的肺泡及支气管周围也存在大量红色荧光,显示在此类组织中Cre重组酶介导的tdTomato表达。而Cre-小鼠的皮肤、心脏和肺部对应组织中几乎检测不到Cre重组酶的活性。
在Col1a2-iCre小鼠模型中,根据组织学形态结构分析,推测皮肤真皮层、心肌细胞之间、心脏瓣膜及心内膜、肺支气管、肺泡发生Cre重组的细胞主要为成纤维细胞。该模型可用于靶向成纤维细胞的组织特异性研究。
注意事项
该品系Cre重组酶基因表达元件插入位点位于小鼠第6号染色体上,请避免使用与Cre工具鼠同条染色体上打靶的基因编辑小鼠进行配繁。