Cdh16-iCre小鼠 | 工具鼠 | 药物筛选评价小鼠模型 | 赛业（苏州）生物科技有限公司

产品编号：C001540

品系全称：C57BL/6JCya-Cdh16^{em2(IRES-iCre)}/Cya

品系背景：C57BL/6JCya

传代建议：纯合与纯合互配/杂合与杂合互配均可

品系描述

Cadherin 16（CDH16）基因编码一种钙依赖性膜相关糖蛋白，属于钙粘蛋白超家族成员，是一种参与胚胎发育和细胞生长的细胞黏附分子。该蛋白仅在肾脏表达，因此也被称为肾特异性钙粘蛋白（ksp-calmodulin），它作为同型细胞识别的主要介质，在组织发育的形态发生方向中起作用，特别是在胚胎发育期间肾小管的形成中。在肾脏发育过程中，CDH16在肾脏和发育中的泌尿生殖（GU）道的肾小管上皮细胞中特异性高表达以在尿液浓缩和排泄过程中发挥重要功能，而在成年小鼠中，该基因的表达仅限于肾小管上皮细胞。突变或功能异常的CDH16基因可能与特发性肾小管性酸中毒和尿酸性肾病等肾脏疾病有关。

Cdh16-iCre小鼠是通过将密码子优化后的Cre重组酶（iCre）基因表达元件插入到小鼠内源性Cdh16基因中，驱动其特异性表达而构建的。iCre重组酶表达模式与内源基因相似，且内源性Cdh16基因表达不受影响。当该小鼠与含有loxP位点的小鼠进行杂交时，其子代小鼠的肾脏和泌尿生殖道的上皮细胞中可以发生由Cre重组酶介导的loxP位点间的序列重组。与Cdh16-Cre小鼠（产品编号：C001452）相比，本品系在肾脏组织中的Cre重组效率更高。然而，需要注意的是，本品系在其他组织（包括生殖系统）中的Cre重组酶表达泄露风险也更高。因此，在目的基因敲除后可能导致小鼠出现胚胎致死或出生后致死的高风险情况下，建议优先选择Cdh16-Cre小鼠模型。

构建方式

通过基因编辑技术将IRES-iCre基因表达元件插入小鼠内源性Cdh16基因TGA终止密码子下游60~100 bp处，其特异性表达受小鼠Cdh16基因的调控。

验证数据

检测方法

将Cdh16-iCre小鼠与条件性表达tdTomato荧光蛋白的Rosa26-LSL-tdTomato小鼠交配，产生双基因杂合子代小鼠。Cre重组酶介导表达终止元件（LSL）的删除将导致tdTomato蛋白在Cre阳性细胞中的表达。当子代小鼠发育到6周龄时，采集小鼠肾脏、肺部、胃部、子宫、输尿管、胰腺、主动脉、白脂、卵巢、睾丸和附睾组织并通过免疫荧光（IF）染色分析tdTomato蛋白的分布，采集小鼠肾脏组织并观察组织的自发荧光信号，以确定Cre重组酶的表达情况。

基因型

Cre+：Cdh16-iCre[KI/+];Rosa26-LSL-tdTomato[CKI/+]；

Cre-：Rosa26-LSL-tdTomato[CKI/CKI]。

检测结果

Cre重组酶在输尿管、胃部和主动脉中的表达情况

图1. 输尿管、胃部和主动脉中tdTomato蛋白的免疫荧光（IF）检测。检测结果显示在Cre+小鼠的输尿管上皮细胞、胃黏膜固有层和主动脉中存在部分tdTomato红色荧光，显示在此类细胞中Cre重组酶介导的tdTomato表达。而Cre-小鼠的对应组织中几乎检测不到Cre重组酶的活性。

Cre重组酶在胰腺、肺部和白脂中的表达情况

图2. 胰腺、肺部和白脂中tdTomato蛋白的免疫荧光（IF）检测。检测结果显示在Cre+小鼠胰腺、肺泡和支气管上皮细胞中存在部分红色荧光信号，显示在此类细胞中已发生Cre重组。此外，在Cre+雄鼠的白脂旁结缔组织中也检测到少量红色荧光。而Cre-小鼠的对应组织中几乎不存在Cre重组酶的活性。

Cre重组酶在睾丸和附睾中的表达情况

图3. 睾丸和附睾中tdTomato蛋白的免疫荧光（IF）检测。检测结果显示在Cre+小鼠附睾管、输出小管假复层柱状上皮中存在少量荧光信号，显示在此类细胞中已发生Cre重组；而在其睾丸组织中未检测到明显的红色荧光，表明在睾丸中未发生Cre重组。

Cre重组酶在子宫和卵巢中的表达情况

图4. 子宫和卵巢中tdTomato蛋白的免疫荧光（IF）检测。检测结果显示在Cre+小鼠子宫柱状上皮、子宫腺中存在大量红色荧光信号，表明在此类组织中已发生Cre重组；而在其卵巢组织中未观察到明显的红色荧光，表明在卵巢中未发生Cre重组。

Cre重组酶在肾皮质和肾髓质中的表达情况

图5. 肾皮质和肾髓质中tdTomato蛋白的荧光检测。检测结果显示在Cre+小鼠肾小管上皮细胞中存在橙色自发荧光信号，表明在此类细胞中已发生Cre重组。而Cre-小鼠的对应组织中几乎不存在Cre重组酶的活性。

总结

在Cdh16-iCre小鼠中，Cre重组酶的表达主要集中于成年小鼠肾（肾小管上皮）和输尿管（上皮细胞）中。同时在子宫（柱状上皮）、附睾（假复层柱状上皮细胞）、胃部（黏膜固有层细胞）、胰腺（导管细胞、腺泡细胞、胰岛细胞）、肺部（肺泡、支气管上皮细胞）和主动脉（平滑肌）中观察到重组信号，而在睾丸、卵巢和白脂组织中未检测到荧光信号。综上，该模型可用于靶向肾小管上皮细胞的组织特异性研究。

注意事项

该品系中Cre重组酶基因表达元件整合位点位于小鼠8号染色体上，请避免使用与Cre工具鼠同条染色体上打靶的基因编辑小鼠进行配繁。