Cyp19a1-IRES-Cre小鼠|Cyp19a1-IRES-Cre工具鼠|价格

产品编号：C001382

品系背景：C57BL/6J

传代方案：阳性鼠与阳性鼠互配

主要表达部位：卵巢颗粒细胞

品系描述

CYP19A1基因编码的芳香酶是细胞色素P450超家族的成员，也称为雌激素合成酶，是一种负责雌激素生物合成关键步骤的酶。细胞色素P450蛋白是单加氧酶，可催化许多涉及药物代谢和胆固醇、类固醇和其他脂质合成的反应，这种蛋白质定位于内质网并催化雌激素生物合成的最后步骤。CYP19A1芳香酶负责将雄激素芳构化为雌激素，可以在许多组织中发现，包括性腺（颗粒细胞）、脑、脂肪组织、胎盘、血管、皮肤和骨骼，以及子宫内膜异位症、子宫肌瘤、乳腺癌和子宫内膜癌的组织，是性发育的一个重要因素^[1-2]。

Cyp19a1-IRES-Cre小鼠利用基因编辑技术构建，将IRES-Cre表达元件插入小鼠内源性Cyp19a1基因终止密码子下游，Cre重组酶的表达模式与内源基因的相似且不影响内源基因的正常表达。当该品系小鼠与含有loxP位点的小鼠杂交后，可在子代小鼠卵巢颗粒细胞中发生由Cre重组酶介导的loxP位点间的序列重组。

构建方式

通过基因编辑技术将IRES-Cre表达元件插入小鼠内源性Cyp19a1基因3'UTR区域。

验证数据

检测方法

将Cyp19a1-IRES-Cre小鼠与Rosa26-LSL-tdTomato小鼠交配，产生双基因杂合子代小鼠，Cre酶介导的重组将导致tdTomato蛋白在子代Cre阳性细胞中表达。分别采集6周龄子代小鼠的卵巢、睾丸和脑组织，通过免疫荧光染色观察Cre重组酶的表达情况。

基因型

实验组（Cre+）：Cyp19a1-IRES-Cre[KI/+];Rosa26-LSL-tdTomato[CKI/+]

对照组（Cre-）：Rosa26-LSL-tdTomato[CKI/+]

检测结果

Cre重组酶在雌性生殖腺中的表达情况

图1. 雌性小鼠卵巢免疫荧光染色。Cre+（Cyp19a1-IRES-Cre[KI/+];Rosa26-LSL-tdTomato[CKI/+]）雌性小鼠在卵巢颗粒细胞中存在大量的tdTomato蛋白红色荧光，表明在该部位存在大量的Cre重组酶表达，而对照组（Cre-）小鼠中检测不到tdTomato红色荧光的表达，不存在Cre重组酶的表达。

Cre重组酶在雄性生殖腺中的表达情况

图2. 雄性小鼠睾丸免疫荧光染色。Cre+（Cyp19a1-IRES-Cre[KI/+];Rosa26-LSL-tdTomato[CKI/+]）雄性小鼠在少量睾丸细胞中存在红色荧光，其定位与DAPI部分重合，表明这些细胞可能为睾丸支持细胞或其他类型细胞；而对照组（Cre-）小鼠中检测不到tdTomato红色荧光的表达，不存在Cre重组酶的表达。

Cre重组酶在脑海马区的表达情况

图3. 脑部海马区免疫荧光染色。Cre+（Cyp19a1-IRES-Cre[KI/+];Rosa26-LSL-tdTomato[CKI/+]）小鼠在海马CA区域结构（图中白色框内位置）中存在部分的红色荧光，显示在此类区域中Cre发生重组；而对照组（Cre-）小鼠中检测不到tdTomato红色荧光的表达，不存在Cre重组酶的表达。(海马CA区：Hippocamp formation-CA，包括CA1和CA2）

Cre重组酶在脑室、纤维束和脑核区域的表达情况

图4. 脑室、纤维束和脑核免疫荧光染色。Cre+（Cyp19a1-IRES-Cre[KI/+];Rosa26-LSL-tdTomato[CKI/+]）小鼠在侧脑室、终纹、尾壳核结构中存在部分的红色荧光，显示在此类区域中Cre发生重组；而对照组（Cre-）小鼠中检测不到tdTomato红色荧光的表达，不存在Cre重组酶的表达。（纤维束区域：终纹-Stria terminalis，图中左侧箭头所示部位；脑室区域：脑侧脑室-Lateral ventricle，图中中间箭头所示部位；脑核区域：尾壳核-Caudoputamen，图中右侧箭头所示部位）

总结

Cyp19a1-IRES-Cre小鼠模型中Cre重组酶的表达主要定位于卵巢颗粒细胞中，同时也可以在脑部的海马区、脑室、纤维束和脑核中的部分细胞中发生由Cre重组酶介导的重组，Cre重组酶的表达与小鼠内源性Cyp19a1基因的表达模式相似，具有良好的特异性。

注意事项

该模型Cre重组酶表达元件插入位点位于9号染色体，请避免使用与Cre工具鼠同条染色体上打靶的基因编辑小鼠进行配繁。

参考文献

Manikandan P, Nagini S. Cytochrome P450 Structure, Function and Clinical Significance: A Review. Curr Drug Targets. 2018;19(1):38-54.
Azcoitia I, Mendez P, Garcia-Segura LM. Aromatase in the Human Brain. Androg Clin Res Ther. 2021 Dec 23;2(1):189-202.