Pdx1-CreERT2小鼠 | 工具鼠 | 药物筛选评价小鼠模型 | 赛业（苏州）生物科技有限公司

产品编号：C001537

品系全称：C57BL/6JCya-Pdx1^{em1(Cre/ERT2)}/Cya

品系背景：C57BL/6JCya

传代建议：杂合与野生型互配/杂合与杂合互配

品系描述

胰腺十二指肠同源基因（Pancreatic and duodenal homeobox 1, PDX1）是编码调节与胰腺发育和β细胞特异基因表达有关的一种特异性转录因子，也是胰腺干细胞分化、成熟过程中的第一个分子标记。PDX1基因的活化可促进胰岛素的释放及β细胞中重要基因的表达，是胰腺干细胞分化为胰岛β细胞的必要条件之一。此外，胰高糖素样肽1（GLP-1）和细胞因子等多种信号转导物质协同调节PDX1基因的表达，在发育过程中，PDX1基因特异性表达于早期胰腺上皮中，并调控其增殖和分化；在成年阶段，PDX1是维持β细胞产生激素所必需的。

Pdx1-CreERT2小鼠是通过基因编辑技术将“P2A-CreERT2”基因表达元件插入小鼠Pdx1基因的终止密码子前，在小鼠Pdx1基因调控元件的驱动下表达CreERT2重组酶所构建的。在未经他莫昔芬处理的情况下，CreERT2重组酶主要存在于细胞质中；只有在他莫昔芬的作用下，CreERT2重组酶才能进入细胞核并发挥其重组作用。当Pdx1-CreERT2小鼠与含有loxP位点的小鼠杂交后，他莫昔芬诱导可以在子代小鼠的胰腺中引发由Cre重组酶介导的loxP位点间的序列重组。需要注意的是，在未经他莫昔芬处理时，可能会观测到少量CreERT2重组酶的诱导前表达泄漏。

构建方式

通过基因编辑技术，将“P2A-CreERT2”基因表达元件插入小鼠Pdx1基因的TGA终止密码子上游。

验证数据

检测方法

将Pdx1-CreERT2小鼠与条件性表达tdTomato荧光蛋白的ROSA26-LSL-tdTomato小鼠交配，以产生双基因杂合的子代小鼠。当子代小鼠发育到8周龄时，连续4天腹腔注射剂量为75 mg/kg的他莫昔芬进行诱导。Cre重组酶介导表达终止元件（LSL）的删除将导致tdTomato蛋白在Cre阳性细胞中的表达。诱导完成一周后，采集小鼠的胰腺、十二指肠、胃部、子宫、卵巢、肺部、肝脏、脑部和胸腺组织进行免疫荧光（IF）染色分析，以确定Cre重组酶的表达情况。

实验分组

Cre+Tam+: Pdx1-CreERT2[KI/+]; Rosa26-LSL-tdTomato[CKI/+]; Tamoxifen；

Cre+Tam-: Pdx1-CreERT2[KI/+]; Rosa26-LSL-tdTomato[CKI/+]; Corn oil。

检测结果

Cre重组酶在胰腺和十二指肠中的表达情况

图1. 胰腺和十二指肠中tdTomato蛋白的免疫荧光（IF）检测。组织学检测结果显示在Cre+Tam+小鼠胰岛细胞中存在大量tdTomato荧光信号，同时在非胰岛细胞和十二指肠的肠绒毛中也观察到红色荧光，显示在此类细胞中Cre重组酶介导的tdTomato表达。经玉米油处理而未经他莫昔芬处理的Cre+Tam-小鼠非胰岛细胞内也检测到少量tdTomato表达泄漏。

Cre重组酶在胃部、子宫、卵巢、肺部和肝脏中的表达情况

图2. 胃部、子宫、卵巢、肺部和肝脏中tdTomato蛋白的免疫荧光（IF）检测。组织学检测结果显示在Cre+Tam+小鼠的胃部、子宫、卵巢、肺部和肝脏中未观察到明显的红色荧光信号，显示在此类组织中未发生Cre重组酶介导的tdTomato表达。经玉米油处理而未经他莫昔芬处理的Cre+Tam-小鼠对应组织中也未检测到荧光信号。

Cre重组酶在胸腺和脑部中的表达情况

图3. 胸腺和脑部中tdTomato蛋白的免疫荧光（IF）检测。组织学检测结果显示在Cre+Tam+小鼠的胸腺中检测到极少量的红色荧光信号，显示在此类组织中Cre重组酶介导的tdTomato表达；而脑部组织中并未观察到明显的红色荧光，表明在脑部未发生Cre重组。经玉米油处理而未经他莫昔芬处理的Cre+Tam-小鼠对应组织中未检测到荧光信号。

总结

在Pdx1-CreERT2小鼠模型中，Cre重组酶在胰腺中显著表达，在十二指肠和胸腺中也观察到少量重组信号，而胃部、子宫、卵巢、肺部、肝脏和脑部组织中未发现明显的重组信号，表明该模型特异性良好。综上，该模型可用于靶向胰岛细胞的组织特异性研究。

注意事项

该品系中CreERT2重组酶基因表达元件整合位点位于小鼠5号染色体上，请避免使用与该Cre工具鼠同条染色体上打靶的基因编辑小鼠进行配繁。